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84農(nóng)業(yè)網(wǎng) 時(shí)間：2018-03-14 作者：佚名 來(lái)源：網(wǎng)絡(luò)整理
奧利亞羅非魚（Oreochromisaureus），系鱸形目、麗魚科、羅非魚屬，是原產(chǎn)于非洲的一種熱帶中小型魚類，它與尼羅羅非魚雜交的后代奧尼羅非魚（奧利亞羅非魚♂×尼羅羅非魚♀），具有高雄性率和明顯的的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)，比雙親生長(zhǎng)快20%～30%，因此多用于做生產(chǎn)奧尼羅非魚的親本。奧利亞羅非魚繁殖條件要求低，具有性成熟早、產(chǎn)卵周期短等特點(diǎn)，只要溫度適宜，就能在小面積靜水水體中一年多次繁殖，在生產(chǎn)上比較容易得到大量的苗種，因此，很少有人對(duì)其進(jìn)行人工繁殖研究。隨著我國(guó)羅非魚的養(yǎng)殖不斷發(fā)展，對(duì)羅非魚的相關(guān)研究也不斷開展，尤其在羅非魚的育種方面，如進(jìn)行雌核發(fā)育，科間雜交等，這就需要通過(guò)人工繁殖來(lái)獲得實(shí)驗(yàn)材料。由于羅非魚是一年多次產(chǎn)卵型魚類，它的性腺發(fā)育是非同步性的，進(jìn)行羅非魚人工繁殖比較困難，很難獲得成熟卵，從而影響羅非魚相關(guān)研究工作的進(jìn)一步深入。經(jīng)過(guò)幾年的摸索，初步掌握了奧利亞羅非魚人工繁殖技術(shù)，2005年進(jìn)行了6批奧利亞羅非魚人工繁殖，現(xiàn)將人工繁殖試驗(yàn)情況總結(jié)如下。
1材料與方法
1.1親魚來(lái)源與培育
親本為淡水漁業(yè)研究中心保存的純種奧利亞羅非魚，年齡1～3齡，體重150～750g。選擇體形完整、體質(zhì)健壯的做親魚，每畝按雌雄比3∶1放養(yǎng)600～800尾。親魚放養(yǎng)前每畝施經(jīng)發(fā)酵的糞肥250～500kg培養(yǎng)天然餌料;親魚下塘后，投喂餅粕、麩皮、配合飼料等人工餌料，日投餌量為魚體重的5%左右。另外，定期補(bǔ)充青菜葉、浮萍等青飼料。投飼按"四定"原則，池水保持"肥、活、嫩、爽"。
1.2產(chǎn)卵池和孵化設(shè)施
產(chǎn)卵池為1.2m×0.8m×1.0m的玻璃水簇箱，池水用曝氣3d以上的自來(lái)水。魚卵在玻璃培養(yǎng)缸和直徑15cm的培養(yǎng)皿中孵化。
1.3雌、雄魚及成熟度的判別
雌魚腹部有三個(gè)孔，即肛門、生殖孔和泌尿孔，泌尿孔在生殖突起的頂端，生殖孔開在肛門和泌尿孔之間，為"一"字形的狹長(zhǎng)開口，與生殖突垂直。雄魚只有兩個(gè)開孔，即肛門和尿殖孔。在繁殖季節(jié)，雄魚體色鮮艷，呈深紫色或紫褐色，背鰭、胸鰭、尾鰭邊緣呈艷麗的桔紅色，雌魚體色則呈灰黃色。性成熟的雌魚在生殖季節(jié)性腺輪廓也不明顯，性腺成熟好的雌魚，順著卵巢方向稍用力擠壓，能擠出卵，且卵粒游離，飽滿有彈性。如果魚口中有卵，則是剛產(chǎn)過(guò)卵不久，不能用于催產(chǎn);如果不能擠出卵或擠出的卵大小不均，且粘連在一起，則成熟度不夠，不適合催產(chǎn);如擠出的卵粒無(wú)光澤，塌扁，用手輕碰就破裂，則過(guò)熟不適合催產(chǎn)。性成熟的雄魚輕擠腹部，會(huì)有透明、稍粘稠的液體從尿殖孔射出。
1.4催產(chǎn)與人工授精
采用一次注射法，胸鰭基部注射，劑量為雌魚4mgDOM＋6μgLRH～A/kg，雄魚減半，每尾魚的注射量控制在1mL內(nèi)。催產(chǎn)后的親魚按雌雄比1∶1放入水簇箱，每個(gè)水簇箱放5～7對(duì)親魚，增氧泵24h增氧。魚發(fā)情時(shí)，將雌、雄親魚撈起，用毛巾擦干，將雌魚卵和雄魚精液擠入小瓷盆中，用羽毛攪動(dòng)1min，再加入適量的生理鹽水，靜止放置2～3min后，倒去生理鹽水，然后將受精卵進(jìn)行孵化。
1.5受精卵孵化與胚胎發(fā)育觀察
將受精卵轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)皿或培養(yǎng)缸中靜水孵化，每個(gè)培養(yǎng)皿放卵50～100粒，培養(yǎng)缸放卵200～300粒。每2h用吸管吹動(dòng)魚卵1次，發(fā)現(xiàn)破卵、死卵立即吸除，定時(shí)換水，保持水質(zhì)清新。胚胎發(fā)育觀察的材料為人工授精的受精卵，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)孵化并進(jìn)行連續(xù)觀察記錄。觀察期間孵化水溫是26～28℃。
1.6魚苗培育
魚苗出膜3d后，腹腔背部出現(xiàn)鰾點(diǎn)，腸管與肛門相通，開始投喂雞蛋黃、輪蟲等或小型枝角類和橈足類，一周后投喂粉狀配合飼料。魚苗開口后7～10d在培養(yǎng)缸中培養(yǎng)，之后放入水簇箱培養(yǎng)，長(zhǎng)到2～3cm時(shí)放入池塘養(yǎng)殖。
2結(jié)果
2.1親魚選擇、催產(chǎn)情況
從5月30日到8月13日，每隔15d左右做一次人工繁殖試驗(yàn)，共做了6次，每次從400尾雌魚中能挑選出6～10尾成熟度好的親魚。6次共催產(chǎn)雌魚40尾，25尾產(chǎn)卵，催產(chǎn)率為62.5%。
2.2效應(yīng)時(shí)間和產(chǎn)卵行為
水溫26～28℃時(shí)，效應(yīng)時(shí)間為28～36h。產(chǎn)卵前，個(gè)體之間因占地盤不停地打斗，雄魚一般勢(shì)強(qiáng)，占據(jù)水簇箱的下層和水簇箱邊角處，雌魚一般勢(shì)弱，多被趕到水簇箱上層�？煲a(chǎn)卵時(shí)，雌魚生殖孔會(huì)突出3～5mm，通常會(huì)下沉到水簇箱底部，占據(jù)一處，并有做窩行為：不時(shí)地將占據(jù)處的雜質(zhì)、臟物銜開。在雌魚做窩期間，常有雄魚與之嬉咬、追逐、打轉(zhuǎn)，直到雌魚產(chǎn)卵，雄魚排精。卵分?jǐn)?shù)次產(chǎn)出，每次間隔2～3min，產(chǎn)出的卵粒隨即吸入口中，魚卵在雌魚口腔內(nèi)孵化。150g的雌魚產(chǎn)卵1200粒左右。
2.3受精卵孵化和胚胎發(fā)育
奧利亞羅非魚卵為沉性卵、無(wú)黏性，形如鴨梨，充滿卵黃，尖的一端為動(dòng)物極。卵的其長(zhǎng)徑為2.06～2.40mm，寬徑為1.53～1.80mm，卵徑大小隨親魚大小而有差異。受精卵吸水后膨脹，飽滿且富有彈性，卵膜透明，在解剖鏡下可清楚看到胚胎發(fā)育情況。受精卵30min左右形成胚盤，開始細(xì)胞分裂，胚胎發(fā)育經(jīng)過(guò)胚盤形成期、卵裂期（2細(xì)胞期，4細(xì)胞期，8細(xì)胞期，16細(xì)胞期，多細(xì)胞期），囊胚期（高囊胚期，平囊胚期）、原腸期（原腸初期，原腸中期，原腸末期）、神經(jīng)胚期（神經(jīng)胚期，胚孔封閉期）、器官形成期（視泡形成期，聽泡形成期，心臟形成期）、血液循環(huán)期、和出膜期。水溫26～28℃時(shí)，受精卵孵化時(shí)間為78～90h，整個(gè)胚胎發(fā)育期積溫約需要2100℃.h。
2.4魚苗培育效果
人工條件下奧利亞羅非魚魚苗很容易培養(yǎng)，除畸形魚苗在出膜2～3d后死亡外，正常苗基本都能存活。
3討論與分析
由于奧利亞羅非魚性腺發(fā)育不同步，很難選出成熟度合適的雌魚。在繁殖季節(jié)，性成熟的雌魚性腺要冬成熟度不夠，要么剛剛產(chǎn)過(guò)卵，成熟度正好的很少，一般選中率只有1.5%～2.5%左右。因此，人工繁殖最好在奧利亞羅非魚出越冬池后第一次產(chǎn)卵（15d左右）時(shí)開始。因?yàn)樵趭W利亞羅非魚出越冬池后到第一次產(chǎn)卵期間，其性腺發(fā)育比較一至，選出成熟度好的親魚機(jī)率高些。另外，在繁殖旺盛期（6月初到7月底），也能選出較多的親魚。選出的親魚必須盡快催產(chǎn)，否則就會(huì)過(guò)熟或自產(chǎn)。
使用腦垂體（PC）、絨毛膜促性腺激素（HCG）、地歐酮（DOM）、魚用促排卵素（LRH-A2）做不同的組合催產(chǎn)奧利亞羅非魚，結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用DOM和LRH-A2組合催產(chǎn)效果較好，但催產(chǎn)率也只有60%左右，因此，催產(chǎn)劑的組合和劑量還有待優(yōu)化。奧利亞羅非魚人工催產(chǎn)效應(yīng)時(shí)間很難把握，選出的雌親魚催產(chǎn)效應(yīng)時(shí)間差別較大，這可能是因?yàn)槠湟荒甓啻萎a(chǎn)卵，性腺發(fā)育不一至造成的。親魚成熟度好則效應(yīng)時(shí)間短，成熟度差則效應(yīng)時(shí)間長(zhǎng);個(gè)體小則效應(yīng)時(shí)間短，個(gè)體大則效應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)，不同的個(gè)體，效應(yīng)時(shí)間相差8～10h。一般100g～150g雌魚催產(chǎn)效果較好。另外，奧利亞羅非魚發(fā)情時(shí)的行為也不是特別明顯，在人工環(huán)境下很難把它們搶占地盤的打斗和發(fā)情時(shí)的嬉咬分開，只有發(fā)現(xiàn)雌魚開始產(chǎn)卵才能認(rèn)為是效應(yīng)時(shí)間到了。試驗(yàn)曾用水泥池做產(chǎn)卵池，結(jié)果很難發(fā)現(xiàn)奧利亞羅非魚什么時(shí)候開始發(fā)情產(chǎn)卵，用玻璃水簇箱做產(chǎn)卵池也是為了便于觀察它們的活動(dòng)、產(chǎn)卵情況。雌魚在快要產(chǎn)卵時(shí)有兩個(gè)前兆，一是生殖孔會(huì)突出3～5mm，二是有做窩行為。當(dāng)發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)特征時(shí)，說(shuō)明效應(yīng)時(shí)間快到了，隨時(shí)都有可能產(chǎn)卵，這時(shí)要特別注意。
奧利亞羅非魚卵孵化時(shí)間較長(zhǎng)，水溫在26～28℃時(shí)，魚卵從受精到出膜要78h以上。在孵化期間，魚卵很容易長(zhǎng)水霉死亡。在少量魚卵孵化時(shí)，用曝氣的冷開可避免魚卵長(zhǎng)水霉。由于奧利亞羅非魚卵的卵黃很多，幾乎充滿整個(gè)魚卵，魚卵長(zhǎng)時(shí)間孵化容易破裂，造成卵黃外漏。尤其是在孵化到原腸期后，畸形卵和未受精卵都會(huì)破裂，正常的受精卵這時(shí)也容易破裂。當(dāng)孵化水溫32℃以上時(shí)，即使發(fā)育良好的卵也會(huì)在孵化前因卵膜破裂卵黃外漏而全部死亡。魚卵破裂后漏出的卵黃還會(huì)使水質(zhì)迅速惡化，從而引起其它正常魚卵缺氧死亡。在培養(yǎng)皿、玻璃缸中靜水孵化時(shí)，要及時(shí)把破裂的魚卵及漏出卵黃吸除，并要經(jīng)常換水。
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