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84農業網 時間:2018-03-14 作者:佚名 來源:網絡整理
本病根據流行病學特點、癥狀和病理變化可作出初步診斷,血常規檢查有助診斷,但最終的確診需要作病原學和血清學等方面的工作。
(一)病毒分離:病毒的分離培養是CIAV鑒定中最常用的方法。肝臟含有高滴度的病毒,是分離CIAV病毒的最好材料,可將肝臟制成勻漿,離心取上清液,加熱70℃5min或用氯仿處理去除或滅活可能的污染物,用于雛雞、雞胚或細胞培養接種。
1.接種雛雞:1日齡SPF雛雞是初次分離CIAV最特異、最可靠的動物實驗方法。用肝臟病料1∶10稀釋肌肉或腹腔接種1日齡SPF雛雞,每只0.1ml,觀察典型癥狀和病理變化。
2.接種雞胚:用肝臟病料卵黃囊接種4~5日齡雞胚,無雞胚病變,孵出小雞發生貧血和死亡。
3.接種細胞培養物:MDCC-MSB1常被作為體外分離鑒定CIAV的主要細胞。病雞的肝、脾、胸腺、骨髓等均可作為分離病毒用的病料。初次接種病料的細胞看不到細胞病變,一般須經過5~6次盲傳后,可見感染細胞腫脹、邊緣破裂,死亡細胞逐漸增多,最后細胞大部分死亡,表明有CIAV感染。
(二)血清學診斷:目前已建立的CIAV血清學診斷技術有VN、IFN、ELISA,可用于檢測感染雞血清中的抗體。其中,ELISA是檢測CIAV抗體的一種良好的血清學方法,其敏感性高,操作簡便、快速,所需血樣少,可以同時檢測大量樣品,利于大規模普查。近年來以重組VP1、VP2、VP3做為包被抗原建立的ELISA技術取得了重大進展,可用以檢測CIAV抗體。與傳統的全病毒抗原相比,重組抗原更具優勢。可用免疫熒光抗體試驗和免疫過氧化物酶試驗檢測發病雞組織或細胞培養物中的病毒抗體。
(三)分子生物學診斷:目前有許多分子生物學方法,如核酸探針技術和PCR等技術,用于組織或細胞中病毒的檢測,其敏感性和特異性都比較高。
(四)鑒別診斷:該病應該與成紅細胞引起的貧血、MDV和IBDV感染、腺病毒感染、球蟲病以及高劑量的磺胺類藥物和真菌毒素中毒進行區別。
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