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84農業網 時間：2018-03-14 作者：佚名 來源：網絡整理
水牛的精液采取冷凍顆粒長期保存，是一種先進技術，它能夠充分發揮優良種畜的性能優勢，使其不受壽命、地點的限制，一頭優良公牛一年可供5000頭母牛配種用精，比本交提高上百倍。
1水牛冷凍顆粒精液理論根據
精子是具有生命活力的性細胞，結構比較復雜，精子在－0.6℃以下至－30℃時，細胞間隙的水分結成冰晶，使細胞脫水，原生質變干，造成精子死亡。另外，大的冰結晶對精子造成機械損傷，使原生質的表層破壞失去保護作用，冰晶滲入精子內部，破壞精子的結構，使精子不能復蘇。但是，水的結晶只能在一定溫度范圍內才能形成，如果低于該溫度范圍就形成玻璃化體，按照玻璃化學說，原生質發生玻璃化對細胞影響較小，如果快速升溫，玻璃化可越過結晶態而直接變為液態，不致于損害精子細胞的結構而使精子死亡。
根據上述原理，在水牛的顆粒精液冷凍的制作過程中，快速越過冰晶危險區的溫度（－60℃至－40℃），才能使冷凍精液取得好的效果。
2水牛冷凍顆粒精液的制作
2.1采精方法用假陰道采精法，將黃牛用的假陰道截短，由50cm截至35cm，內胎由67cm截至46cm，改集精杯為膠漏斗接上10～15ml茶色刻度離心管。優點：A、操作方便，減少精子和假陰道的接觸，使精子少受外界不利因素的影響;B、收集精液快;C、可直接看出射精量。
2.2采精頻率采精頻繁，每次的射精量和濃度降低;采精次數過少，采得的精液衰老精子多，不能利用，以每月采精10～13次比較合理。
2.3精液的品質檢查檢查要迅速，要求精液濃度在每毫升含精子10億以上，活力在0.7級以上，精子畸形率不得超出15%。
2.4稀釋稀釋液要有營養，抗菌、抗冷和適當的pH值（6.4～6.8），相等的滲透壓。1號液：12%蔗糖77ml，甘油3ml，蛋黃20ml，青霉素10萬單位，鏈霉素10萬單位;2號液：14%乳糖75ml，甘油5ml，蛋黃20ml，青霉素10萬單位，鏈霉素10萬單位。稀釋倍數按照稀釋后每毫升含有精子3～4億為原則。
2.5平衡精液衡釋后，進行鏡檢，如和衡釋前相比無變化，可將盛精液瓶用棉塞封口，再用4～8層紗布包好，放在裝有冰塊的廣口保溫瓶中平衡3～4小時，使精子有一段適應低溫的時間，并使保護劑甘油滲入精細胞內，產生抗凍作用。
2.6顆粒制作
2.6.1滴凍前鏡檢：經過平衡的精液，在滴凍前要進行一次鏡檢，如精子活力和平衡前差異大而又達不到0.6級以上不進行滴凍。
2.6.2制粒方法：將盛有7成滿液氮的廣口保溫瓶放好，在液氮面上放一鋁盒，將鋁盒蓋翻蓋在鋁盒上，再接上量溫感應器，直測盒蓋的溫度，當溫度達到－90℃至－130℃，方可滴凍。將經過平衡和鏡檢達到滴凍標準的存放精液廣口保溫瓶放在方便操作處，不要取出精液瓶，防止升溫，用預冷好的滴管吸取精液，每滴0.1ml，快速滴凍，然后進行1～2分鐘熏蒸、脫粒、浸入液氮。再進行解凍鏡檢，如活力在0.3級以上，收入液氮中保存。繼續進行滴凍，要求滴凍速度快，手壓滴管的膠球用力要均勻，逐步向內壓，不得放松。否則，進入空氣，出現氣泡。
2.6.3收粒保存：凍完后收入液氮罐小提筒中可做長期保存，在收存中要注意顆粒暴露在空氣中時間不能長。經過試驗，用塑料瓶存放顆粒比提筒好，可從小瓶上方鉆孔進入液氮，取用方便，又可保持顆粒不暴露在空氣中。
2.7解凍
2.7.11號解凍液：檸檬酸鈉2.9g，蒸餾水100ml;2號解凍液：檸檬酸鈉1.7g，蔗糖1.15g，碳酸氫鈉0.09g，氨苯磺胺0.3g，磷酸二氫鉀0.325g，蒸餾水100ml，青霉素10萬單位，鏈霉素10萬單位。以上兩種解凍液，2號解凍液解凍后保存時間較長，可以運到站點輸精，1號解凍液可用于隨時解凍隨時使用。
2.7.2解凍溫度：取1毫升解凍液，注入經過消毒的青霉素小瓶內，放在45℃水中預熱，當瓶內溫度達到40℃～45℃時，放入一粒冷凍顆粒，不斷搖動使之融化。鏡檢精子活力，如達到0.3級以上便可輸精。
2.8顆粒冷凍精液的運輸冷凍顆粒用10立升的液氮缺罐運輸，在提取時要填好標簽，注明品種、牛耳號、冷凍時間等，運輸過程中不能振動、碰擊，要存放牢固、通風、防烈日照曬。
3水牛冷凍精液的應用
3.1適時輸精信陽水牛一年四季都發情，但有明顯的淡旺季之分，一般3～8月份發情較多，其他月份較少。配種年齡一般控制在2.5歲。發情周期平均為25天。每次發情持續時間為1.5～3天。一般在發情45小時后開始輸精，此時母牛性欲已消失，子宮頸充血腫脹已減退，子宮頸口待關閉，黏液量減少，實踐證明在此時輸精受胎率高。
3.2輸精方法我場多采取直腸把握子宮頸輸精法，此法簡便、易于操作，精液可直接輸到子宮深部，使精液不易倒流，通過直腸觸摸不會因誤配引起流產，用此種方法輸精受胎率高。
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