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84農業網 時間：2018-03-14 作者：佚名 來源：網絡整理
人工授精技術可分兩類三種方法：第一類為液態精液人工授精技術，又可分為二種方法，①鮮精或1∶2～4低倍稀釋精液人工授精技術，一只公羊一年可配母羊500～1000只以上，比用公羊本交提高10～20倍以上。用這種方法，將采出的精液不稀釋或低倍稀釋，立即給母羊輸精，它適用于母羊季節性發情較明顯，而且數量較多的地區。②精液1∶20～50，高倍稀釋人工授精技術，一只公羊一年可配種母羊10000只以上，比本交提高200倍以上。如江蘇省海門市，地處長江三角洲，交通便利，多年來，利用這一技術，全市只有一個改良站制作高倍稀釋精液，每鄉鎮設立輸精點，實行統一供精，一只公羊每年配種母羊10000～15000只，精期受胎率可達90%。液態精液如果組織得不好，或在山區及交通不便而母羊較少的地區，會出現精液用不完而浪費的現象。降低了精液的利用率。第二類為冷凍精液人工授精技術，可把公羊的精液常年冷凍貯存起來，在任何地方、時間都可使用。如制作顆粒冷凍精液，一只公羊一年所采出的精液可冷凍10000～20000粒顆粒，可配母羊2500～5000只。精液用多少可解凍多少，不會造成浪費。但受胎率較低，高者在50%以上，低的只有30%～40%，其成本高，效果較差。
現將具體操作技術分述如下：
一、采精前的準備
1.種公羊采精調教
一般說，公羊采精是較容易的事情，但有些波爾山羊公羊，尤其是初次參加配種的公羊，就不太容易采出精液來，可采取以下措施：
①.同圈法：將不會爬跨的公羊和若干只發情母羊關在一起過幾夜，或與母羊混群飼養幾天后公羊便開始爬跨。
②.誘導法：在其他公羊配種或采精時，讓被調教公羊站在一旁觀看，然后誘導它爬跨。
③.按摩睪丸：在調教期每日定時按摩睪丸10～15分鐘，或用冷水濕布擦睪丸，經幾天后則會提高公羊性欲。
④.藥物刺激：對性欲差的公羊，隔日每只注射丙睪丸素1～2毫升，連注射3次后可使公羊爬跨。
⑤.將發情母羊陰道沾液或尿液涂在公羊鼻端，也可刺激公羊性欲。
⑥.用發情母羊做臺羊。
⑦.調整飼料，改善飼養管理，這是根本措施，若氣候炎熱時，應進行夜牧。
2.器械洗滌和消毒
人工授精所用的器械在每次使用前必須消毒，使用后要立即洗滌。新的金屬器械要先擦去油漬后洗滌。方法是：先用清水沖去殘留的精液或灰塵，再用少量洗衣粉洗滌，然后用清水沖去殘留的洗衣粉，最后用蒸餾水沖洗1～2次。
(1).玻璃器皿消毒：將洗凈后的玻璃器皿倒扣在網籃內，讓剩余水流出后，再放入烘箱，在115℃下消毒30分鐘。可用消毒杯柜或碗柜消毒，價格便宜、省電。消毒后的器皿透明，無任何污漬，才能使用，否則要重新洗滌、消毒。
(2).開腔器、溫度計、鑷子、磁盤等消毒：洗凈、干燥后，在使用前1.5小時，用75%液精棉球擦試消毒。
3.假陰道的按裝、洗滌和消毒
先把假陰道內胎(光面向里)放在外殼里邊，把長出的部分(兩頭相等)反轉套在外殼上。固定好的內胎松緊適中、勻稱、平正、不起皺折和扭轉。裝好以后，在洗衣粉水中，用刷子刷去粘在內胎外殼上的污物，再用清水沖去洗衣粉，最后用蒸餾水沖洗內胎1～2次，自然干燥。
在采精前1.5小時，用75%酒精棉球消毒內胎(先里后外)待用。
附：配制75%酒精，用購買的醫用酒精，一般為95%濃度，取其79毫升，加蒸餾水21毫升即為75%濃度的酒精。
二、采精
1.選擇發情好的健康母羊作臺羊，后軀應擦干凈，頭部固定在采精架上(架子自制，離地發情通一個羊體高)。訓練好的公羊，可不用發情母羊作臺羊，還可用公羊作臺羊、假臺羊等都能采出精液來。
2.種公羊在采精前，用濕布將包皮周圍擦干凈。
3.假陰道的準備：將消毒過的，酒精完全揮發后的內胎，用生理鹽水棉球或稀釋液棉球從里到外的擦試，在假陰道一端扣上消毒過并用生理鹽水或稀液沖洗后甩干的集精瓶(高溫低于25℃時，集精瓶夾層內要注入30℃～35℃溫水)。在外殼中部生水孔注入150毫升左右的50℃～55℃溫水，擰上氣卡塞，套上雙連球打氣，使假陰道的采精口形成三角形，并好氣卡。最后把消毒好的溫度計插入假陰道內測溫，溫度在39℃～42℃為宜、在假陰道內胎的前1/3，涂抹稀釋液或生理鹽水作潤滑劑(可不用凡士林，經多年實踐不用任何潤滑劑，不影響公羊射精)。就可立即用于采精。
4.采精操作
采精員蹲在臺羊右側后方，右手握假陰道，氣卡塞向下，靠在臺羊臀部，假陰道和地面約呈35度角。當公羊爬跨、伸出陰莖時，左手輕托陰莖包皮，迅速地將陰莖導入假陰道內，公羊射精動作很快，發現抬頭、挺腰、前沖，表示射精完畢，全過程只有幾秒鐘。隨著公羊從臺羊身上滑下時，將假陰道取下，立即使集精瓶的一端向下堅立，打開氣卡活塞，放氣卡取下集精瓶(不要讓假陰道內水流入精液，外殼有水要擦干)，送操作室檢查。采精時，必須高度集中，動作敏捷、做到穩、準、快。
5.種公羊每天可采精1～2次，采3～5天，休息一天。必要時每天采3～4次。二次采精后，讓公羊休息2小時后，再進行第三次采精。
三、精液品質檢查
精液品質檢查項目很多，這里只介紹幾種常用的項目
①.肉眼觀察：正常精液為乳白色，無味或略帶腥味。凡帶有腐敗味，出現紅色、褐色、綠色的精液均不可用于輸精。公山羊正常的射精量范圍是0.5～2.0毫升，平均為1.0毫升。
②.精子活率檢查在載玻片上滴原精液或稀釋后的精液1滴，加蓋玻片，在38℃顯微鏡溫度下(可按顯微鏡大小，自制保溫箱，內裝40瓦燈泡1只，既照明又保溫)檢查。精子運行方式：有直線前進運動，回旋運動和擺動三種。評定精子活率以直線前進運動精子百分率為依據，通常是用十級評分法。大約有80%的精子做直線前進運動的評為0.8，有60%精子做直線前進運動的為0.6，依次類推。山羊原精液活率一般可達0.8以上。但新引進的波爾山羊第一年使用活率往往較差,原精活率只有0.6,第二年就提高了。
在檢查(評定)精子活率時，要多看幾個視野，并上下扭動顯微鏡細螺旋，觀察上、中、下三層液層的精子運動情況，才能較精確的評出精子的活率。
③.密度檢查
估測法：在檢查精子活率的同時進行精子密度的估測。在顯微鏡下根據精子稠密程度的不同。
將精子密度評為“密”、“中”、“稀”三級、“密”級為精子間空隙不足一個精子長度，“中”級為精子間有1～2個精子長度空隙，“稀”級為精子間空隙超過2個精子長度以上，“稀”級不可用于輸精。
精小計數法：用血細胞計算板較精確的計算出每毫升精液中的精子數，在精液高倍稀釋時，要以精子數和精子活率來計算出精液稀釋倍數。計算方法是：用紅細胞吸管、取原精液至0.5刻度處，再吸入3%的氯化鈉溶液至101刻度處，將原精液稀釋200倍。以母指及食指分別按吸管的兩端搖均，然后弄去吸管前數滴，將吸管尖端放在計算板與蓋玻片之間的空隙邊緣，使吸管中的精液流入計算室(高0.1毫米)，充滿其中。計算板中央用刻線分成25個正方形大格，共由400個小方格組成，面積為1平方毫米。在200、400倍顯微鏡下數出五個大方格(四角各一個，再加中央一個大方格，共80個小方格)內的精小數。計算時以精子頭部為準，位于大方格四邊線條上的精子，只數相鄰兩邊的精子，避免重復。數出四個大方格的精子總數后加7個。即為1毫升原精液的精子數。
每毫升山羊精液中含精子數為10～50億，平均為30億。精子計數可10～15天進行1次。有條件的地方可用密度儀器測定。
四、液態精液稀釋配方與配制
1.精液低倍稀釋的稀釋液，在精液采出后，原精數量不夠時，可作低倍稀釋，密度儀器測定。滿足需要，并在短時間內使用，稀釋液配方可簡單些。如生理鹽水；奶類稀釋液：用鮮牛、羊奶，水浴92℃～95℃消毒15分鐘,冷卻去奶皮后即可使用。凡用于高倍稀釋精液的稀釋液,都可作低倍稀釋用。
2.精液高倍稀釋的稀釋液，不但是為了擴大精液量，而要延長精子的保存時間，配方很多，現介紹2個稀釋液。
(1)葡萄糖3克，檸蒙酸鈉1.4克，EDTA(乙二胺四乙酸二鈉)0.4克，加蒸餾水至100毫升，溶解后水浴煮沸消毒20分鐘，冷卻后加青霉素10萬單位，鏈霉素0.1克，若再加10～20毫升卵黃，可延長精子存活時間。
(2)葡萄糖5.2克、乳糖2.0克、檸檬酸鈉0.3克，EDTA0.07克，三墓0.05克，蒸餾水100毫升，溶解后煮沸消毒20分鐘，冷卻后加龐慶大霉素1萬單位，卵黃5毫升。
五、液態精液稀釋
原精液活率在0.6以上萬可用于稀釋輸精。
1.精液低倍稀釋，原精液量夠輸精時，可不必再稀釋，可以直接用原精直接輸精。不夠時按需要量作1∶2～4倍稀釋，要把稀釋液加溫到30℃，再把它緩慢加到原精液中，搖勻后即可使用。
2.精液高倍稀釋，要以精子數、輸精劑量、每一劑量中含有1000萬個前進運動精子數，結合下午最后輸精時間的精子活率，來計算出精液稀釋比例，在30℃下稀釋(方法同前)。
六、分裝、保存和運輸
精液低倍稀釋，就近輸精，把它放在小瓶內，不需降溫保存，短時間用畢。
1.分裝保存
(1)小瓶中保存；把高倍稀釋清液，按需要量(數個輸精劑量裝入小瓶，蓋好蓋，用蠟封口，包裹紗布，套上塑料袋，放在裝有冰塊的保溫瓶(或保存箱)中保存，保存溫度為0℃～5℃。
(2)塑料管中保存：作者等把精液以1∶40倍稀釋，以0.5毫升為一個輸精劑量，注入飲料塑料吸管內(剪成20厘米長，紫外線消毒)，兩端用塑料封口機封口，保存在自制的泡沫塑料的保存箱內(箱底放凍好的冰袋，再放泡沫塑料隔板，把精液管用紗布包好，放在隔板上面，固定好)蓋上蓋子，保存溫度大多在4℃～7℃，最高到9℃。精液保存10小時內使用，這種方法，可不用輸精器了，經濟實用。
2.運輸
不論那種包裝，精液必須固定好，盡可能減輕振動。若用摩托車送精液，要把精液箱(或保溫瓶)放在背包中，背在身上。若乘汽車送精液，最好把它抱在身上。
七、冷凍精液制作技術
制作冷凍精液，要有很多設備，好在各省、區都有精液冷凍站，可用它來兼凍波爾山羊精液，不需增加設備，有的站已經開始冷凍波爾山羊精液，并取得較好的效果。作者等研究成功的80年代在北京市門頭溝區冷凍絨山羊精液，獲得情期受胎率73%的好結果，現介紹給大家，供參考。
1.稀釋液配方與配制
Ⅰ液 葡萄糖3克、檸檬酸鈉3克，加蒸餾水至100毫升，溶解后，水浴煮沸消毒20分鐘，冷卻后加青霉素10萬單位，鏈霉素0.1克，取80毫升加卵黃20毫升。
Ⅱ液 取Ⅰ液44毫升，加甘油6毫升。
2.精液冷凍制作
采出的精液，檢查活率在0.6以上者即可冷凍，在30℃下用Ⅰ液(30℃)進行1∶1.5倍稀釋，包上8層紗布放在4℃冰箱中預冷降溫2～小時，在4℃下加與Ⅰ液等量的含甘油的Ⅱ液，搖勻，最終稀釋比例為1∶３倍稀釋，立即在氟板上滴凍成0.1毫升的顆粒。取本稀釋液Ⅰ液94毫升，加甘油6毫升，合成一液，就可以冷凍細管精液。
八、母羊發情鑒定
1.以母羊發情外部表現來判斷母羊發情
本地母山羊發情外部表現較明顯，發情時發出叫聲，食欲減退，興奮不安，對外界刺激反應敏感，搖頭擺尾，有交配欲，喜歡接近公羊，在公羊追趕爬跨時常站立不動，讓公羊交配；陰門腫大，流出粘液。從母羊發情的外部表現來判斷母羊是否發情是比較容易的。但養羊戶往往不注意，就不能確知母羊的發情開始時間，給適時輸精造成困難。
2.試精
用試精公羊試情，能準確找出發情母羊，做到適時輸精。最簡便的方法是，在試情前將公羊腹部帶兜上試情布(長40～45厘米，寬35～40厘米，四角縫上25～30厘米長的帶子)，每日早晨一次或早晚各一次將公羊放入母羊群中試情。當母羊接受公羊爬跨，站立不動，或母羊圍著公羊旋轉，并不斷搖尾，都是母羊發情的表現，及時把它抓出，待配。
3.試情公羊選擇和飼養管理
試情公羊必須選擇體質結實、健康無病，性欲旺盛，動作靈敏的1～5歲公羊。試情公羊與母羊的比例以1∶30～40為宜。在配種前一個月驅蟲，加強飼養管理，除放牧采食或舍飼喂草外，每天補飼0.2～0.3公斤混合精料。每隔10～15天，給試情公羊排精一次，增強性欲。
九、輸精
1.輸精時間
適時輸精，對提高母羊的受胎率十分重要。山羊的發情持續時間為24～48小時。排卵時間一般多在發情后期30～40小時。因此，比較適宜的輸精時間應在發情中期后(即發情后12～16小時)。如以母羊外部表現來確定母羊發情的，若上午開始發情的母羊，下午與次日上午各輸精1次；下午和傍晚開始發情的母羊，在次日上下午各輸精1次。每天早晨1次試情的，可在上下午各輸精1次。2次輸精間隔8～10小時為好，至少不低于6小時。若每天早晚各1次試情的，其輸精時間與以母羊外部表現來確定母羊發情相同。如母羊繼續發情，可再行輸精1次。
2.母羊保定
本文介紹一種不需輸精架的倒立保定法，它沒有場地限制，任何地方都可輸精。保定人將母羊頭夾緊在兩腿之間，兩手抓住母羊后腿，將其提到腹部，保定好不讓羊動，母羊成倒立狀。用溫布把母羊外陰部擦干凈，即待輸精
3.輸精方法
(1).子宮頸口內輸精：將經消毒后在1%氯化鈉溶液浸涮過的開膣器裝上照明燈(可自制)，輕緩地插入陰道，打開陰道，找到子宮頸口，將吸有精液的輸精器通過開膣器插入子宮頸口內，深度約1厘米左右。稍退開膣器，輸入精液，先把輸精器退出，后退出開膣器。進行下只羊輸精時，把開膣器放在清水中，用布洗去粘在上面的陰道粘液和污物，擦干后再在1%氯化鈉溶液浸涮過；用生理鹽水棉球或稀釋液棉球，將輸精器上粘的粘液，污物自口向后擦去。
(2).陰輸精：將裝有精液的塑料管從保存箱中取出(需多少支取多少支，余下精液仍蓋好)，放在室溫中升溫2～3分鐘后，將管子的一端封口剪開，擠1小滴鏡檢活率合格后，將剪開的一端從母羊陰門向陰道深部緩慢插入，到有阻力時停止，再剪去上端封口，精液自然流入陰道底部，拔出管子，把母羊輕輕放下，輸精完畢，再進行下只母羊輸精。
裝在小瓶中保存的高倍稀釋精液，要用輸精器吸入后再輸精(余下精液仍在0～5℃下保存)，可作子宮頸口內或陰道輸精。液態精液情期受胎率方，80%以上。有人做過試驗，陰道輸精的情期受胎率比子宮頸口內輸精的降低不到2%。所以說情期液態精液可以陰道輸精，而且塑料管又可代替輸精器，便于推廣應用。冷凍精液必須進行子宮頸口內輸精，否則會降低受胎率。有條件用腹腔鏡子宮角內輸精，能使冷凍精液受胎率提高。
4.輸精量
原精輸精每只羊每次輸精0.05～0.1毫升，低倍稀釋為0.1～0.2毫升，高倍稀釋為0.2～0.5毫升，冷凍精液為0.2毫升以上。
5.冷凍精液解凍
解凍好壞對解凍后活率有很大影響。本人采用40℃水溫解凍顆粒精液，先把小試管用維生素B12(每支含0.5毫克)沖洗一下，留一點B12，并快速在40℃水中搖動至2/3融化，取出試管繼續速搖至全部融，解凍后活率較好，可試試。另外，建議做一個泡沫塑料小盒，倒上液氮，再把冷凍精液袋放入氮液中，這樣可避免未解凍的顆粒精液，因升溫又入液氮降溫，影響活率。
十、所需器材、藥品、用品、表格
1.所需器材、藥品、用品
所需物品大部分已在文章中提到了。用于配制稀釋液的藥品、試劑：如葡萄糖要一水的、檸檬酸鈉、EDTA(乙二胺四乙酸二鈉)都要分析純的，青、鏈霉素不要過期的，卵黃需新鮮雞蛋，要用不加水的鮮奶。假陰道內胎，玻璃器皿易破損的物品要多準備一些。顯微鏡保溫箱、開膣器照明燈、精液保存箱等能自己做的盡可能自己做，在實踐中要有所創新。如要開展冷凍精液輸精，要配備好液氮罐。
2.表格
有種公羊精液品質檢查表；母羊配種記錄表；精液使用登記表，及日常事務記錄等，各項記錄必須按時、準確填寫。是為了統計分析，總結經驗，改進工作。
十一、建立人工授精站和輸精點
地處平川的，可象江蘇省海門市那樣全市就改良站制作高倍稀釋精液，負責統一供精，每個鎮獸醫站設一個輸精點，負責農戶母羊輸精。地處山區的，可劃片建立人工授精站，全縣可建2～3個人工授精站，在鄉鎮或母羊多的村設輸精點。若采用冷凍精液輸精，縣里又無精液冷凍設備，人工授精站可統一購買冷凍精液，轉給各鄉鎮輸精點，每點配備液氮罐，由人工授精站定期到各輸精點添加液氮。有條件地地方也可購置冷凍精液設備，飼養波爾山羊公羊，自己制作冷凍精液，也是可以的。但不能提倡，因為我國現有冷凍精液設備，已夠用的了。還可在配種季節，季節性的集中母羊，建立短期的人工授精站，采用鮮精或低倍稀釋精液輸精，到配種季節末結束。各地可根據具體情況，采用、創新。
1.建立人工授精站的條件和基本建設
人工授精站應建立在背風、向陽、干燥、有水源、牧草地面積大或有較多的農田，無疾病流行史，交通便，母羊數量多，又是一縣的中心地帶，這樣便于每天送或取精液，因為高倍稀釋精液，當天精液只能當天使用，第二天使用就要降低受胎率，就得天天取送精液，設在邊遠地區就不方便了。人工授精站設有：采精室(兼作輸精室)、精液處理室(要有頂棚)、公羊圈舍、母羊圈、飼料間、獸醫室、工作人員宿舍等。
2.建立輸精點的條件
設在母羊較集中，交通較方便的地方，把點設在鄉、鎮獸醫站也可以，不論是用摩托車還是乘公共汽車取或送精液，在上午10時前精液必須到各輸精點，這樣單程不能超過2小時，山區最遠點距人工授精站20～30公里，平川可遠到50公里以外。各地可根據當地的具體條件來建點。輸精點設有：輸精室、母羊舍(供發情母羊過夜)、工作人員宿舍等。
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