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84農業網 時間：2018-03-14 作者：佚名 來源：網絡整理
對蝦白斑綜合癥病毒（WhiteSpotSyndromeVirus，wssv）病是全世界范圍內對養殖對蝦危害最大的病毒病。迄今為止，學者們對引起該病的病毒命名尚不統一，有白斑桿狀病毒（WhiteSpotBac-ulovirus，WSBV）、皮下及造血組織壞死病桿狀病毒（HepodermalandHematopoietieNecroisisBacu-lovirus，HHNBV）、日本對蝦桿狀病毒（Rod-shapednuclearVirusofPenacusJaponicus，RV-PJ）和系統外胚層和中胚層桿狀病毒（SystemicEc-todermalandMesoderrnalBaculovirus，SEMBV）等。所有這些病毒均被認為屬于桿狀病毒科的無包涵體桿狀病毒亞群。在第六次國際病毒分類會議（ICTV）報告中取消了以上命名，具體命名待定，按照Lightener的意見將其暫時命名為白斑綜合癥病毒（wssv）。我國自1993年暴發此病以來，每年都發生對蝦大規模毀滅性死亡，幾乎所有養殖蝦類皆可被其感染。WSSV毒力較強，3～10天內被浸染者的累積死亡率達100.0%。世界動物衛生組織（OIE）2000年將其列為“需要作報告的疾病之一”。鑒于WSSV尚未有有效的治療方法，快速準確的病原分離檢測技術已成為研究的焦點之一。本文就對蝦白斑綜合癥病毒（wssv）的檢測技術作一綜述，以供參考。
1直接觀察法
直接觀察法是根據養殖過程中對蝦急性和慢性死亡的情況，對照白斑綜合癥的典型癥狀作出判斷。如頭胸甲出現白斑、甲殼變軟易剝離等，這種方法主要是根據實踐經驗判斷，且必須是對蝦感染病毒致死后才能發現。
2組織化學法與電子顯微鏡技術
組織化學法是取對蝦的各種組織用適當的染色技術在光鏡下進行檢測。主要有H-E染色和T-E染色等。莫照蘭等（2000）曾用H-E染色感染WSSV病毒的螯蝦的鰓和胃組織，在光鏡下觀察病變組織與對照組呈現差異顯著，組織結構松散殘缺呈壞死狀態。黃傻等首創一種用于現場診斷的T-E染色方法，整個檢測過程只需要10分鐘左右，具有快捷、簡單、方便等優點，但是，這種方法對操作技術要求高，而且由于對蝦可能終生帶毒而不發病，因此，即使檢測到病毒也不能確認一定會發病。相對而言電子顯微鏡觀察更為準確，可直接觀察到病毒的形態和大小。吳友呂等（1995）曾用電鏡在對蝦體內檢測到WSSV。姜明等（1996）對中國對蝦在病害暴發期間病蝦肝胰臟、鰓、腎和腸組織進行固定切片，在透射電鏡蝦觀察到桿狀病毒的3種存在形態。莫照蘭等（2002）對螯蝦人工感染WSSV病毒并取鰓和胃用固定液固定，制成超薄切片在電鏡下觀察到WSSV的病毒粒子。謝數濤等（2000）純化WSSV病毒并負染后在電鏡下觀察發現病毒的精細結構。Nunan等（1998）和Zhan等（1998）也曾對對蝦人工感染WSSV進行了電子顯微鏡觀察。組織化學與電子顯微鏡技術都是在病毒大量增殖后才能觀察到，當感染早期或處于潛伏期病毒量小時，則難以觀察到。
3免疫學檢測技術
免疫學檢測技術是根據抗原抗體反應建立的，方法多種多樣，主要用于快速鑒定。單克隆抗體和多克隆抗體的制備是進行檢測的必需工作。單克隆抗體技術是隨著雜交瘤細胞建立而發展起來的，可以產生對特異決定簇的特異抗體。優點是制備抗體時抗原不需高度純化、特異性強；缺點是制備繁瑣、試驗條件嚴格、易漏檢。多克隆抗體來源于抗血清，含所有抗原決定簇的抗體，易發生交叉反應，出現假陽性，特異性不強，一般不用于對蝦病毒的檢測。
對蝦病毒的檢測一般采用單克隆抗體，常用酶聯免疫吸附分析（EIJSA）實驗。酶聯免疫吸附分析是目前發展最快的免疫標記技術，具有靈敏、快速、易操作、可定量等優點，應用廣泛。于佳等（1995）將WSSV病毒注射小鼠，用免疫后的脾細胞與Sp2/O骨髓瘤細胞融合，篩選出了可用于WSSV檢測的單克隆抗體。黃
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