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84農(nóng)業(yè)網(wǎng) 時(shí)間：2018-03-15 作者：佚名 來(lái)源：網(wǎng)絡(luò)整理
本課題組于2005年8月到2006年3月，在天津及華北地區(qū)進(jìn)行了較大規(guī)模的白靈菇液體菌種生產(chǎn)與應(yīng)用推廣工作，推廣面積達(dá)180棟棚室（560平方米/棟），平均生物學(xué)效率達(dá)45%，菇農(nóng)與公司獲得了雙贏。現(xiàn)將該技術(shù)總結(jié)如下，以供大家參考。
1固體母種制作
將冷藏的母種提前活化3～5d，制平板挑取優(yōu)質(zhì)菌絲尖端進(jìn)行提純復(fù)壯。取新鮮無(wú)霉變的稻草切成3cm段200g；另取200g削皮、去芽的馬玲薯，切成棱形塊，約金桔大小，放入冷水盆備用。用不銹鋼鍋，加2000mL自來(lái)水（pH7.0～7.5）與上述馬玲薯及稻草同煮，煮沸計(jì)時(shí)30min，將其用多層醫(yī)用紗布過(guò)濾，取過(guò)濾液近1000mL，加瓊脂20g，完全溶化后，再加入葡萄糖20g，七水合硫酸鎂1.5g，磷酸氫二鉀3g，VB1，4mg完全溶解后，定溶1000ml，pH自然。大于45℃趁熱分裝18mm×180mm硬質(zhì)試管110～125支，加棉塞，并用雙層聚丙烯塑料薄膜包好，7支1捆滅菌備用。滅菌壓力達(dá)0.12MPa記時(shí)，保持25min。冷卻至45℃將培養(yǎng)基試管取出，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)試管，防止冷凝積水，立即擺斜面并去掉包膜防止其被污染。24h與48h后查有無(wú)細(xì)菌和霉菌。每批試管培養(yǎng)基污染率不得超過(guò)2%；否則，必須重做。培養(yǎng)基滅菌合格標(biāo)準(zhǔn)是斜面如同鏡面一般光滑，無(wú)冷凝水、無(wú)麻點(diǎn)，無(wú)雜菌。
保藏母種18mm×180mm硬質(zhì)試管，每支可轉(zhuǎn)接30～60支生產(chǎn)母種。在無(wú)菌區(qū)內(nèi)，挑取優(yōu)質(zhì)菌絲體，迅速接種于試管培養(yǎng)基上，一點(diǎn)接種。25℃條件下，暗培養(yǎng)，20～24h菌絲開(kāi)始萌動(dòng)，培養(yǎng)10～12d菌絲體可滿(mǎn)管。在此期間，每天檢查1次。如有雜菌，甚至雖無(wú)污染，但長(zhǎng)勢(shì)不健壯的一并棄掉，嚴(yán)格把住菌種關(guān)。
2液體培養(yǎng)基制備及液體菌種培養(yǎng)
液體菌種的生產(chǎn)使用天津市豐禾食用菌有限責(zé)任公司實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠(chǎng)生產(chǎn)、天津師范大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院監(jiān)制的FHCC-LSI-64設(shè)備。
生產(chǎn)液體菌種必備的兩個(gè)條件：熟練掌握無(wú)菌操作技術(shù)；菌種生產(chǎn)環(huán)境干燥、整潔、可控溫26～28℃。
2.1液體培養(yǎng)基制備將土豆去皮去芽，切棱形塊200g，菇根適量，麥麩50g，一并放入不銹鋼鍋，文火煮沸30min，多層醫(yī)用紗布過(guò)濾，取過(guò)濾液加葡萄糖20g，磷酸二氫鉀3.0g，硫酸鎂1.5g，維生素B1，4mg，將其完全溶解后，定容1000mL。制備若干，分裝于40只圓形平底玻璃培養(yǎng)器（2000mL）中，裝量為1500～1600mL，并加磁子1只，高壓滅菌2h，28～30℃下接種，置電動(dòng)磁力控制器上培養(yǎng)。
2.2接種與終止培養(yǎng)的判斷在無(wú)菌條件下，挑取試管母種菌絲體漂浮于培養(yǎng)器中，接種量為1支試管母種最多可接5400mL。多點(diǎn)接種，28℃條件下靜置培養(yǎng)48h，待出現(xiàn)菌落后，置電動(dòng)磁力控制器上，26～28℃條件下培養(yǎng)。培養(yǎng)液顏色由深變淺，待培養(yǎng)至菌絲片段既不下沉，也不上浮，與液體混為一體時(shí)，可終止培養(yǎng)，84～96h。此時(shí)，視為壯齡期，方可用于接種。
2.3液體菌種的鑒別靜置培養(yǎng)液體菌種48h后，或終止培養(yǎng)后，無(wú)菌條件下取10mL檢查。一看：用放大鏡看是否有赤、橙、黃、綠、青、藍(lán)、紫等雜色，或在液體表面出現(xiàn)菌膜等異常現(xiàn)象，視為被污染；二聞：取出的培養(yǎng)物，若有異味，視為被雜菌污染。
3出菇菌棒的制作與培養(yǎng)
出菇菌棒的制作：當(dāng)?shù)仄骄鶜鉁胤�(wěn)定在20℃左右開(kāi)始裝袋。配方：棉子殼72%，木屑13%，麥麩8%，玉米粉2%，石膏粉2%，生石灰3%，另加菜園土15%。培養(yǎng)基含水量60%～62%，充分拌勻，建堆發(fā)酵，并加入發(fā)菌劑，發(fā)酵料堆底寬1.2m，堆高1.0m，堆長(zhǎng)不限。自然建堆后打孔通氣孔距40～50cm。當(dāng)料堆溫達(dá)55℃左右時(shí)，保持48h后，進(jìn)行第1次翻堆，整堆打孔覆膜。當(dāng)料堆溫達(dá)60～70℃時(shí)，每隔1d翻堆1次，并充分換位。共需7～8d，待料為均勻棕褐色，質(zhì)地均勻，富有彈性，料味純正，料表面有較多的放線(xiàn)菌時(shí)，說(shuō)明料發(fā)酵成功，散堆降溫，pH7.5～8.5，含水量60%可裝袋。選用與栽培種相同的菌袋，菌袋培養(yǎng)基料柱高約20cm，加無(wú)棉塑料封口蓋，6～8h內(nèi)將料裝完，立即滅菌。每筐豎擺共20只菌棒。0.15MPa高壓滅菌2h，或常壓滅菌12～14h，50～60℃出鍋。32～35℃下接種，一端接種，接種量為40mL/袋，或每袋栽培種接出菇菌棒25只。栽培種的制作與培養(yǎng)配方：棉子殼87%，玉米粉3%，麥麩5%，石膏粉2%，生石灰3%。培養(yǎng)基料水比為1∶1.1～1.2，充分拌勻，悶料5～6h，迅速裝袋，低壓聚乙烯筒料，菌袋折徑（17cm×34cm×0.05cm），裝干料550～600g。采用中間打孔的裝袋機(jī)裝袋，培養(yǎng)基料柱高約20cm，加無(wú)棉塑料蓋封口，裝筐滅菌。壓強(qiáng)0.15MPa高壓滅菌2h。一端接種，將菌液均勻地接種料面，接種量為40mL/袋。25～28℃條件下常規(guī)培養(yǎng)，18～20d菌絲體滿(mǎn)袋，較固體菌種縮短8～10d。在氧原子消毒器下開(kāi)放式接種，一般接出菇菌棒900～1000只/人?8h。4人配組接種最佳，要做到快打口蓋，快接種，快封口蓋。
出菇菌棒發(fā)菌培養(yǎng)：發(fā)菌必備四個(gè)基本條件：即暗培養(yǎng)、環(huán)境干燥、適宜的溫度、常通風(fēng)換氣。發(fā)菌分為四個(gè)時(shí)期，即①菌絲萌動(dòng)定植期：接種后先控制環(huán)境溫度在26～28℃，少通風(fēng)或不通風(fēng)，盡量不搬動(dòng)菌袋。目的是使菌絲盡快渡過(guò)其遲緩期，早萌發(fā)，早定植。接種后的第10～18h菌種開(kāi)始萌發(fā)，24h菌絲開(kāi)始吃料定植。②菌絲生長(zhǎng)旺盛期：第4d后，菌絲細(xì)胞呼吸量逐漸增大，產(chǎn)生的熱量也逐漸增多，應(yīng)保持料溫19～22℃，空氣相對(duì)濕度60%～65%，每天溫和通風(fēng)2～3次。時(shí)常檢查菌絲的長(zhǎng)勢(shì)、料溫，及時(shí)翻垛，發(fā)現(xiàn)有雜菌立即清除。約培養(yǎng)18～20d菌絲滿(mǎn)袋。③菌絲體復(fù)壯期：此時(shí)，菌袋表面已布滿(mǎn)菌絲體，但是，其內(nèi)部還未布滿(mǎn)也不健壯，所以要對(duì)菌棒進(jìn)行菌絲體復(fù)壯。復(fù)壯需要18～20℃培養(yǎng)7d左右。④菌絲體后熟期：所謂后熟期，是指由營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)轉(zhuǎn)入生殖生長(zhǎng)的準(zhǔn)備期，主要是菌絲細(xì)胞內(nèi)部的生理生化變化，為生殖生長(zhǎng)作物質(zhì)和能量的準(zhǔn)備。需要35～45d后熟，及時(shí)排除袋內(nèi)積水（菌絲老化細(xì)胞自溶出現(xiàn)的黃水）。控制溫度24～25℃，控制光照在500～800lx，適當(dāng)減少通氣，減少菌棒表面菌皮過(guò)多的發(fā)生，并對(duì)菌棒進(jìn)行最終分類(lèi)。
4出菇管理
4.1排場(chǎng)白靈菇出菇方式有多種，可根據(jù)實(shí)際情況選擇使用。按45～54只/平方米擺放菌袋，560平方米的溫室可擺放28000～30000只菌棒。選生長(zhǎng)發(fā)育一致的菌棒，覆土碼垛出菇。只在搔菌的一端出菇，也可不搔菌直接出菇。具體的方法是對(duì)所用土進(jìn)行常規(guī)消毒處理，割去菌袋中間薄膜2/3，出菇端留1/3，砌成單排菌墻，10～13層高，層于層和袋與袋之間間隔2cm，用泥勾縫，頂部留水槽，便于后期補(bǔ)營(yíng)養(yǎng)液。
4.2搔菌菌絲體生理成熟的指標(biāo)：一則菌棒內(nèi)菌絲體潔白濃密；二是菌棒表面出現(xiàn)菌皮；三是菌棒堅(jiān)硬；四是個(gè)別菌棒已出現(xiàn)白色米粒狀原基；五是有效積溫達(dá)2200～2500℃（有效積溫＝平均日溫×天數(shù)）。菌絲體達(dá)生理成熟應(yīng)及時(shí)搔菌，即在菌棒一端中央處，挖掉大衣鈕扣大小（Φ3.5～4.0cm）的菌皮，露出新鮮菌絲體。搔菌過(guò)早、過(guò)遲均影響出菇。
4.3養(yǎng)菌將搔菌后松系袋口，升溫至20～22℃，盡量恒溫培養(yǎng)，使損傷的菌絲體得以恢復(fù)，即在搔菌處長(zhǎng)出較多新的菌絲體。個(gè)別的會(huì)出現(xiàn)氣生菌絲，約需要5～7d。
4.4以低溫為主刺激原基發(fā)生與分化待搔菌處幾乎看不到培養(yǎng)料均為菌絲體時(shí)，給予菌棒－2～7℃低溫刺激，白天最適宜溫度7～14℃，以8℃為中心。晝夜溫差應(yīng)保持10℃以上，連續(xù)7～15d左右。大于18℃時(shí)，原基難于分化成菌蕾。將空間濕度提高到75%～80%，只是在地面上撒水或溝里打水，并給予通氣和散射光800～1500lx的刺激。待原基出現(xiàn)后，繼續(xù)給予上述刺激，促使其原基分化成菌蕾。此時(shí)，應(yīng)特別注意通氧氣。
4.5疏花疏果當(dāng)原基為綠豆大小時(shí)，解袋口，待有的原基已分化為黃豆大小菇蕾時(shí)，上挽袋口的一半，并進(jìn)行疏花疏果，即留大去小，留壯棄弱，只留1個(gè)長(zhǎng)勢(shì)健壯形狀規(guī)則的菇蕾，且不可改變菌蕾方向或位置。待菇蕾發(fā)育至鴿子蛋大小時(shí)，將袋口完全割去。
4.6育菇疏花疏果后，迅速調(diào)室內(nèi)相對(duì)濕度80%～85%，散射光強(qiáng)度600～1000lx，光照度12～14h/d，提升溫度至10～14℃，盡量恒溫培養(yǎng)，常通風(fēng)換氣。12～15d即可采收。
5采收加工與保鮮
5.1采收當(dāng)白靈菇重120～200g/只，即可采收。采收前1日停水。每天早晚各采收1次。白靈菇可分4個(gè)等級(jí)，即一級(jí)；子實(shí)體掌形，菇形規(guī)則，菇體潔白，菌蓋直徑8～150n，每只120～200g，菌蓋平展，表面光滑，邊緣圓正未上蹺，無(wú)明顯的皺褶或裂痕。菌褶排列整齊，菌柄小于2.0cm。二級(jí)：菇體潔白，菇形掌狀，菇形基本規(guī)則，菌蓋直徑8～16cm，每只在75～250g，菌蓋較平滑或稍有波紋，菌蓋基本圓正，沒(méi)有明顯的裂痕，菌褶排列較整齊，菌柄小于2.0cm。三級(jí)：菇體潔白，菇形掌狀，菇形較規(guī)則，菌蓋直徑7～16cm，每只在50～250g，菌蓋有波紋邊緣呈波浪形，菌蓋表面有細(xì)微的裂痕，菌褶排列不整齊，無(wú)明顯病斑，菌柄在2～5.0cm。等外品：不符合上述三級(jí)產(chǎn)品的統(tǒng)稱(chēng)為等外品。
5.2保鮮將掌形子實(shí)體的菇菌柄切至2.0cm，用食品軟紙包好每個(gè)子實(shí)體，放入泡沫箱中每箱3～5kg。30cm×47cm×20cm的泡沫塑料箱，箱重0.45kg。裝箱的白靈菇，室內(nèi)溫度在－6～－8℃條件下，可保鮮25～30d；4～10℃下冷藏，可保鮮15～25d；15℃可保質(zhì)4～5d。如在0～1℃預(yù)冷15～20h，5～10kg的箱，0℃（－0.5～0.5℃）條件下可保鮮1～2個(gè)月。
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